槲皮素对PEDV感染幼龄仔猪的生长性能、血液生化指标和肠道吸收与屏障功能的影响

【目的】 试验旨在探讨槲皮素在防治仔猪感染猪流行性腹泻病毒（PEDV）中的作用。【方法】 选取18头体重相近、健康的7日龄仔猪（杜×长×大）,随机分为3组（对照组、PEDV组和PEDV+槲皮素组）,每组6个重复,每个重复1头猪,试验期共11 d。经过3 d适应期后,于试验第4~10天给PEDV+槲皮素组仔猪口腔灌服10 mg/kg BW的槲皮素,其他组仔猪口腔灌服等体积的人工乳,于试验第8天给PEDV组与PEDV+槲皮素组仔猪口腔灌服1×10^4.5TCID₅₀的PEDV,对照组灌服等体积的PBS溶液。试验第11天早上空腹称重,全部仔猪灌服D-木糖（0.1 g/kg BW）,1 h后经前腔静脉采血,检测血液生化指标、血浆二胺氧化酶（DAO）活性和D-木糖含量;将所有仔猪屠宰取空肠黏膜,检测肠道屏障相关基因,包括肠绒毛蛋白（villin）,紧密连接蛋白-1（claudin-1）,闭合蛋白（occludin）和肠型脂肪酸结合蛋白（iFABP）的相对表达量。【结果】 与对照组相比,PEDV组仔猪平均日增重显著下降（P<0.05）,粪便评分显著升高（P<0.05）;血液中高密度脂蛋白含量显著降低（P<0.05）,肌酐和尿素氮的含量显著提高（P<0.05）;血浆中D-木糖含量显著降低（P<0.05）;空肠claudin-1、iFABP基因的相对表达量显著下调（P<0.05）。与PEDV组相比,PEDV+槲皮素组仔猪平均日增重和血浆D-木糖含量显著升高（P<0.05）;血液中肌酐和尿素氮的含量显著降低（P<0.05）;空肠claudin-1、villin和iFABP基因的相对表达量显著上调（P<0.05）。【结论】 10 mg/kg BW槲皮素可在一定程度上缓解PEDV感染导致的仔猪生长抑制和肾功能损伤,增强肠道吸收与屏障功能。     

槲皮素对PEDV感染幼龄仔猪肠道形态、抗氧化功能及空肠脂质代谢基因表达的影响

【目的】 通过研究槲皮素对猪流行性腹泻病毒（PEDV）感染仔猪肠道形态、肠道抗氧化功能及空肠脂质代谢相关基因相对表达量的影响,旨在探讨槲皮素对PEDV感染仔猪肠道的保护作用。【方法】 选取18头健康的7日龄断奶仔猪,随机分为3组：对照组、PEDV组和槲皮素＋PEDV组,每组6个重复,每个重复1头猪。试验期8 d,于试验第0~7天,对槲皮素＋PEDV组仔猪每天口腔灌服10 mg/kg BW的槲皮素,其余组灌服等体积的人工奶。于试验第5天晚上给PEDV组和槲皮素＋PEDV组仔猪口腔灌服10^4.5TCID₅₀的PEDV,对照组仔猪灌服相同体积的PBS溶液。于试验第8天早上屠宰,取仔猪十二指肠、空肠、回肠及结肠组织样品进行检测。【结果】 与对照组相比,PEDV组仔猪空肠和回肠的绒毛高度以及绒毛高度与隐窝深度比值极显著降低（P<0.01）,空肠、回肠和结肠中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和总超氧化物歧化酶（T-SOD）的活力显著降低（P<0.05）,十二指肠、空肠、回肠和结肠中过氧化氢酶（CAT）的活力显著降低（P<0.05）,回肠和结肠中丙二醛（MDA）的含量显著升高（P<0.05）,空肠中载脂蛋白A1（APOA1）、载脂蛋白B （APOB）、载脂蛋白C2（APOC2）、脂肪酸结合蛋白2（FABP2）、酰基辅酶A合成酶长链家族成员3（ACSL-3）和脂肪酸合酶（FASN）基因的相对表达量极显著下调（P<0.01）。与PEDV组相比,槲皮素＋PEDV组仔猪空肠和回肠的绒毛高度以及绒毛高度与隐窝深度比值极显著提高（P<0.01）,空肠、回肠和结肠中GSH-Px和T-SOD的活力显著提高（P<0.05）,十二指肠、空肠和结肠中CAT的活力显著提高（P<0.05）,回肠和结肠中MDA的含量显著降低（P<0.05）,空肠中APOB、FABP2和FASN基因的相对表达量极显著上调（P<0.01）。【结论】 添加槲皮素可有效缓解PEDV感染导致的仔猪肠道损伤,提高仔猪肠道抗氧化能力以及空肠脂质代谢的能力。     

低磷饲粮中超量添加植酸酶对肉鸡生长性能、屠宰性能、消化器官指数、养分表观利用率及胫骨指标的影响

本试验旨在研究低磷饲粮中超量添加植酸酶对肉鸡生长性能、屠宰性能、消化器官指数、养分表观利用率及胫骨指标的影响。选取1日龄罗斯308商品肉仔鸡公雏2 160只,随机分为5组,每组12个重复,每个重复36只。正对照组(PC组)饲喂基础饲粮,负对照组(NC组)饲喂低磷饲粮(钙和有效磷水平均比PC组降低0.15%),试验组在低磷饲粮的基础上分别添加500(NC500)、1 500(NC1500)和4 500 FTU/kg(NC4500)的植酸酶。试验期39 d。结果表明:1)NC和NC500组14、25和38日龄体重以及1~14日龄、15~25日龄和1~38日龄平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、育肥指数显著低于PC组(P<0.05)。除NC4500组1~38日龄ADFI显著高于PC组(P<0.05)外,NC1500和NC4500组38日龄体重以及1~38日龄ADG、ADFI、育肥指数与PC组差异不显著(P>0.05)。2) NC组钙表观利用率显著低于PC组(P<0.05),NC500、NC1500和NC4500组日均排钙量显著低于PC组(P<0.05)。NC500、NC1500和NC4500组磷表观利用率显著高于NC和PC组(P<0.05),日均排磷量显著低于NC和PC组(P<0.05)。3)NC组胫骨强度显著低于其他各组(P<0.05),NC4500组胫骨强度显著高于其他各组(P<0.05)。4) NC组26、39日龄肝脏指数显著高于PC组(P<0.05),NC1500和NC4500组26日龄空肠、回肠指数显著低于PC和NC组(P<0.05),NC1500和NC4500组39日龄肝脏、胰腺、十二指肠、空肠指数显著低于NC组(P<0.05)。5) NC组全净膛率、腿率均显著低于PC组(P<0.05),NC1500和NC4500组全净膛率显著高于NC组(P <0.05),NC500、NC1500和NC4500组腿率显著高于NC组(P<0.05)。6)与PC组相比,NC1500、NC4500组每只鸡收益分别增加了0.61、0.49元。由此可见,本试验条件下,低磷饲粮中超量添加植酸酶能改善肉鸡生长性能、屠宰性能,提高钙、磷利用率及胫骨强度,提高经济效益,其中植酸酶适宜添加量为4 500 FTU/kg。     

宫内发育迟缓仔猪小肠形态和屏障功能相关基因的表达特征

为了研究宫内发育迟缓(IUGR)仔猪小肠形态和屏障功能相关基因的表达特征,选取24窝"长白×大白"杂交新生仔猪,每窝选取1头IUGR仔猪和1头正常出生体重(NBW)仔猪,分别于7、21和28日龄屠宰8头IUGR仔猪和8头NBW仔猪,采集小肠样品进行分析。结果表明:1)与NBW仔猪相比,IUGR仔猪7日龄时空肠绒毛高度、21日龄时空肠和回肠绒毛高度显著降低(P<0.05),28日龄时空肠隐窝深度显著提高(P<0.05)。2)与NBW仔猪相比,IUGR仔猪7日龄时空肠黏膜闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、封闭蛋白-1(claudin-1)、闭合蛋白(occludin)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-8以及21日龄时空肠黏膜ZO-1和occludin、回肠黏膜ZO-1的mRNA相对表达量显著下调(P<0.05);28日龄时空肠黏膜肿瘤坏死因子-α和回肠黏膜白细胞介素-1β的mRNA相对表达量显著上调(P<0.05),回肠黏膜IL-4的mRNA相对表达量显著下调(P<0.05)。综上所述,IUGR仔猪的空肠和回肠形态受损,紧密连接蛋白基因表达下调,免疫细胞因子表达异常,进而影响小肠屏障功能。     

复合乳酸菌制剂对黄羽肉鸡生长性能、胃肠道pH、肠道形态和盲肠微生物的影响

本研究旨在探究复合乳酸菌制剂(CLP)对黄羽肉鸡生长性能、组织器官指数、胃肠道pH、肠道形态以及盲肠微生物数量的影响。选取1日龄体重相近、健康状况良好的黄羽肉鸡母鸡2100只,随机分成5组,每组6个重复,每个重复70只。对照组饲喂基础饲粮,抗生素组在基础饲粮中添加120 mg/kg的恩拉霉素,试验组分别在基础饲粮中添加0.1%、0.2%和0.3%的复合乳酸菌制剂。试验期72 d,分为1~25日龄、26~50日龄和51~72日龄3个阶段。结果表明:1)与对照组相比,抗生素组肉鸡各阶段平均日采食量(ADFI)在数值上有所提高(P>0.05);1~72日龄,0.3%复合乳酸菌制剂组肉鸡ADFI显著降低(P<0.05)。与抗生素组相比,1~25日龄、26~50日龄和1~72日龄,0.3%复合乳酸菌制剂组肉鸡ADFI显著降低(P<0.05)。与对照组相比,26~50日龄,抗生素组和各复合乳酸菌制剂组肉鸡料重比均显著降低(P<0.05)。2)与抗生素组相比,0.1%复合乳酸菌制剂组肉鸡脾脏指数显著提高(P<0.05),0.2%复合乳酸菌制剂组法氏囊指数显著提高(P<0.05)。3)与对照组相比,0.3%复合乳酸菌制剂组肉鸡腺胃pH显著降低(P<0.05),0.2%和0.3%复合乳酸菌制剂组十二指肠pH显著降低(P<0.05)。4)与对照组相比,抗生素组和0.3%复合乳酸菌制剂组肉鸡空肠绒毛高度与隐窝深度比值显著提高(P<0.05)。5)与对照组相比,0.3%复合乳酸菌制剂组肉鸡盲肠大肠杆菌数量显著减少(P<0.05),且显著低于0.1%复合乳酸菌制剂组(P<0.05)。综上所述,在本试验条件下,饲粮添加复合乳酸菌制剂可以提高黄羽肉鸡免疫器官指数,降低胃肠道pH,改善肠道黏膜形态并调节盲肠微生物平衡,从而降低肉鸡料重比,提高饲料转化效率,且以0.3%添加水平效果较好。     

基于16S rDNA测序分析腹腔注射苦参碱的昆明小鼠肠道菌群结构

旨在通过16S rDNA测序技术分析腹腔注射苦参碱的昆明小鼠肠道菌群的结构。本研究将20只昆明小鼠随机分为2组,分别是苦参碱组(MT组)和阴性对照组(NC组),连续腹腔给药5 d,每天给药2次,收集各组粪便和各肠段组织,进行β多样性、Lefse及Metastats分析,qPCR检测差异菌种在各肠段的mRNA表达量,通过KEGG分析肠道菌群变化导致的代谢途径差异。稀释曲线结果显示,所测样本数据足以反映样品中物种多样性;β多样性分析结果显示,苦参碱可以调节肠道菌群的结构,Lefse及Metastats分析结果均显示,苦参碱显著增加了拟杆菌门(Bacteroidetes)、拟杆菌目(Bacteroidales)、Muribaculaceae、益生菌嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)的丰度,而显著减少了厚壁菌门(Firmicutes)、瘤胃菌科(Ruminococcaceae)和脱硫弧菌属(Desulfovibrio)的丰度。与Lefse及Metastats分析结果一致,qPCR结果显示苦参碱组小鼠粪便中嗜酸乳杆菌含量增加。同时,苦参碱可以增强嗜酸乳杆菌在各肠段的定植。通过KEGG分析发现,NC与MT组之间在聚糖的生物合成与代谢、运输与分解代谢等代谢途径存在显著差异。本研究结果表明,腹腔注射苦参碱可以显著改变昆明小鼠肠道菌群的结构,增加有益菌嗜酸乳杆菌在肠道中的定植,并造成了聚糖生物合成与代谢、运输与分解代谢等代谢途径的差异,为进一步揭示苦参碱发挥药效作用的机理奠定了基础。     

丁酸梭菌对肉鸡肠道短链脂肪酸含量和菌群多样性的影响

【目的】 探究丁酸梭菌在肉鸡消化道内的定植能力以及丁酸梭菌对肉鸡肠道短链脂肪酸含量和菌群多样性的影响。【方法】 选择90只健康状况良好的1日龄爱拔益加肉鸡,随机均分为空白组和丁酸梭菌组,每组3个重复,每个重复15只鸡。空白组灌喂生理盐水,丁酸梭菌组灌服荧光标记的丁酸梭菌,3 h及16日龄进行解剖并采集回肠上皮细胞观察荧光情况。随后另外选择30只健康状况良好的1日龄雏鸡,随机分为对照组和试验组,试验组1~6 d饲喂含丁酸梭菌的饲粮,之后饲喂基础饲粮,对照组全程饲喂基础饲粮,试验期21 d。在16和21日龄时,分别采集回肠和盲肠中段内容物,测定乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、己酸和总短链脂肪酸含量,并进行微生物种类、物种丰度比例、菌属以及蛋白功能丰度等差异分析。【结果】 3 h及16日龄丁酸梭菌组回肠上皮细胞周围均呈现出荧光现象,表明丁酸梭菌能够定植于消化道上皮细胞。短链脂肪酸含量测定结果显示,与对照组相比,在肉鸡回肠内容物中,试验组16日龄乙酸、丙酸、异丁酸、异戊酸和戊酸含量均极显著增加（P<0.01）;21日龄丙酸、异戊酸和戊酸含量均极显著增加（P<0.01）,乙酸、异丁酸和总短链脂肪酸含量均显著增加（P<0.05）;在盲肠内容物中,试验组16日龄肉鸡丁酸和戊酸含量均极显著增加（P<0.01）,异戊酸和己酸含量显著增加（P<0.05）;21日龄丁酸和异戊酸均极显著增加（P<0.01）,乙酸、异丁酸、己酸和总短链脂肪酸均显著增加（P<0.05）。门水平上微生物种类分析发现,16日龄样本中厚壁菌门为优势菌群,丰度最高;21日龄样本中微生物种类增多,其中变形菌门、厚壁菌门和拟杆菌门为优势菌群,丰度较高,16和21日龄试验组的优势菌群均高于对照组。物种丰度比例分析结果显示,与对照组相比,16日龄试验组厌氧菌属的物种丰度比例显著增加（P<0.05）,而去氟球菌属、丛毛单胞菌属、肠杆菌属等7种菌属的物种丰度比例显著降低（P<0.05）;21日龄试验组铁杆菌属、毛球菌属等6种菌属的物种丰度比例显著增加（P<0.05）,变形菌属、浮霉菌属、装甲菌门GP5的物种丰度属显著降低（P<0.05）。菌属差异分析结果显示,16日龄试验组起重要作用的微生物是布劳特氏菌属,对照组起重要作用的微生物是梭状芽孢杆菌属和未分类毛螺旋菌属;21日龄试验组起重要作用的微生物是未分类拟杆菌、毛球菌属、乳酸杆菌目、乳球菌属等,对照组起重要作用的微生物是诺兰克酸杆菌GP4、丛毛单胞菌科等。菌群蛋白功能丰度分析结果显示,16日龄试验组甲基受体趋化性蛋白、谷胱甘肽S-转移酶、氨基酸转移酶亚基A的丰度均高于对照组,21日龄试验组ECF亚家族RNA聚合酶δ-70因子、丙氨酸的丰度均高于对照组。【结论】 丁酸梭菌可以在肉鸡回肠上皮细胞中定植;丁酸梭菌可增加肠道内容物中短链脂肪酸含量、微生物种类及有益菌属,提高物种丰度及功能蛋白丰度,从而促进肠道功能发挥。     

硒化大蒜多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

【目的】 研究硒化大蒜多糖（sGPS）对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响,以期为硒化大蒜多糖的作用挖掘和临床应用提供依据。【方法】 依次通过分离、纯化得到大蒜多糖（GPS）,并经硝酸-亚硒酸钠硒化修饰得到sGPS₃、GPS₅和sGPS₆。以小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,用6.25、12.5、25、50、100 μg/mL sGPS₃、GPS₅、sGPS₆及10 μg/mL脂多糖（LPS组）处理小鼠腹腔巨噬细胞48 h,同时设置不加药物的细胞为对照组,用中性红法测定其吞噬功能,CCK-8法测定其増殖能力,筛选出活性最好的硒化大蒜多糖;然后用ELISA法检测活性最好的硒化大蒜多糖对巨噬细胞上清液中一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、白介素-12（IL-12）含量的影响;再通过小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验测定空白对照组（生理盐水）及高（2 mg/mL）、中（1 mg/mL）、低（0.5 mg/mL）剂量活性最好的硒化大蒜多糖的吞噬指数与吞噬百分率。【结果】 除6.25 μg/mL sGPS₃外,6.25、12.5、25、50和100 μg/mL sGPS₃、sGPS₅、sGPS₆组小鼠腹腔巨噬细胞的A_{490 nm}值均显著高于对照组（P<0.05）,其中,50和100 μg/mL sGPS₆组的A_{490 nm}值显著高于LPS组（P<0.05）,因此选用sGPS₆进行后续试验;12.5、25、50和100 μg/mL sGPS₆组小鼠腹腔巨噬细胞上清中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著高于对照组,25、50和100 μg/mL sGPS₆组小鼠腹腔巨噬细胞上清中IFN-γ、IL-12显著高于对照组（P<0.05）,其中100 μg/mL sGPS₆组小鼠腹腔巨噬细胞上清中NO、TNF-α、IL-12显著高于LPS组（P<0.05）。2和1 mg/mL sGPS₆组的吞噬指数和吞噬率均显著高于空白对照组（P<0.05）。【结论】 硒化大蒜多糖能增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能和増殖能力,促进细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌。     

丙氨酰谷氨酰胺二肽对早期断奶仔猪抗氧化能力及肠道保护的研究

本试验旨在研究丙氨酰谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对早期断奶仔猪抗氧化能力和肠道保护的影响。采用完全随机化设计,选用体质量、胎次、泌乳量、产仔数相近、健康的云南撒坝母猪所产的48头仔猪(1/2♂,1/2♀),35日龄断奶,随机分成4个处理,每个处理3个重复,每个重复4头。A组为对照组,饲喂基础日粮,B、C和D组分别饲喂添加0.15%、0.30%和0.45%Ala-Gln的试验日粮。试验期为35~60日龄。结果表明,添加0.15%、0.30%和0.45%Ala-Gln可提高断奶仔猪生长性能,随饲粮Ala-Gln添加水平提高,日采食量、体质量呈二次曲线上升(P<0.05),料重比呈二次曲线降低(P<0.05)。第49日龄的仔猪血清T-AOC和T-SOD含量以二次曲线方式升高(P<0.05),血清MDA活性呈二次曲线降低(P<0.01)。小肠形态学观察结果显示,仔猪十二指肠和回肠绒毛长度以二次曲线方式升高(P<0.01),空肠绒毛长度以二次曲线方式升高(P<0.05),十二指肠和空肠隐窝深度以二次曲线方式降低(P<0.05),十二指肠、空肠和回肠绒毛长度和隐窝深度比值(V/C)以二次曲线方式提高(P<0.01)。结...     

Evaluation of the chicory inulin efficacy on ameliorating the intestinal morphology and modulating the intestinal electrophysiological properties in broiler chickens

Chicory (Cichorium intybus) belongs to plants of the Compositae family accumulating energy in the form of inulin fructan. Chicory, a prebiotic, is a fermentable oligosaccharide and oligofructose that may affect the intestinal mucosal architecture and the electrophysiological parameters. Therefore, this study was conducted to evaluate the effectiveness of adding chicory fructans in feed on the intestinal morphology and electrogenic transport of glucose in broilers. Four hundred, 1 day old broiler chicks were randomly divided into two groups (200 bird per group) for 5 weeks. The dietary treatments were (i) control, (ii) basal diets supplemented with the dried, grinded ground chicory pulp containing inulin (1 kg of chicory/ton of the starter and grower diets). In duodenum, dietary chicory increased the villus height and villus width and villus height to crypt depth ratio (p < 0.05), but the duodenal crypt depth remained unaffected (p > 0.05). However, in jejunum, the villus height, crypt depth and villus height to crypt depth ratio were decreased by dietary chicory compared with control birds (p < 0.05). In ileum, the villus height and villus crypt depth was decreased by dietary chicory supplementation compared with control (p < 0.05), but, the villus height to crypt depth ratio was increased (p < 0.05). Moreover, dietary chicory relatively affected the electrophysiological parameters of the intestine but did not reach significance. The amount of ΔIsc after d ‐glucose addition to the jejunal mucosa was numerically higher for chicory fed birds (19 μA/cm²) than control birds (10 μA/cm²). The percentage of increase in the Isc after d ‐glucose addition (ΔIsc %) was higher for chicory group upto (90%) of the control group. In colon, the actual Isc value and Isc after d ‐glucose addition was numerically higher for chicory fed birds than control birds (p > 0.05). Moreover, the conductance of jejunal and colonic tissues after d ‐glucose addition remained unaffected by the dietary chicory. In conclusion, addition of chicory to broilers diet increased the duodenal villus height, villus width and villus height to crypt depth ratio and decreased the villus height and crypt depth in both jejenum and ileum. Furthermore, dietary chicory relatively modified the small intestinal electrogenic transport of glucose in broilers.